膠體金一般在弱堿環(huán)境下帶負(fù)電荷，會(huì)與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)形成牢固的結(jié)合，一般稱這種結(jié)合叫靜電結(jié)合，所以不影響蛋白質(zhì)的生物特性。除了與蛋白質(zhì)結(jié)合以外，它還可以與許多其它生物大分子結(jié)合，如SPA、PHA、ConA等。根據(jù)膠體金的一些物理性狀，如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應(yīng)，加上結(jié)合物的免疫和生物學(xué)特性，從而使膠體金廣泛地應(yīng)用于免疫學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域。

 

膠體金標(biāo)記技術(shù)，實(shí)質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過(guò)程。用于膠體金標(biāo)記的蛋白必須要經(jīng)過(guò)前處理，其目的在于：

 

1、去除高濃度的鹽分，高濃度的鹽分往往干擾蛋白與膠體金的吸附結(jié)合，或?qū)е履z體金粒子的凝聚，這一步往往采用低濃度緩沖液來(lái)進(jìn)行。

2、使蛋白分子盡量分散為單體，凍干蛋白或高濃度蛋白溶液中蛋白分子往往凝聚為多聚體大分子，可同時(shí)與多個(gè)膠體金粒子結(jié)合，影響標(biāo)記的靈敏度和定量分析。

3、使蛋白具有適當(dāng)?shù)姆肿恿?。蛋白分子量過(guò)?。?0 kD），形成的蛋白復(fù)合體往往是不穩(wěn)定，可短時(shí)間內(nèi)失活。而分子量過(guò)大時(shí)，被認(rèn)為影響探針的靈敏度，特別是已知蛋白的結(jié)構(gòu)與活性中心的情況下，去除對(duì)活性影響的結(jié)構(gòu)部分是提高標(biāo)記靈敏度，延長(zhǎng)探針壽命（防止凝集）的有效辦法。把分子量過(guò)小的蛋白與其它蛋白（如牛血清蛋白等）結(jié)合后，能制備出穩(wěn)定性更強(qiáng)的探針。