孔雀石綠檢測(cè)試劑盒本試劑盒原理是競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法,利用萃取劑從樣品中提取到孔雀石綠. 在固相載體微孔板中加入標(biāo)準(zhǔn)和處理的樣品,然后加入孔雀石綠抗體,反應(yīng)30分鐘后洗板,然后加入HRP標(biāo)記的孔雀石綠孵育30分后洗板,洗滌后加入顯色劑,結(jié)合的酶將無(wú)色的顯色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物;加入反應(yīng)終止液后使顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色;在450nm波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè),樣品中的孔雀石綠濃度與吸收光強(qiáng)度成反比 。
孔雀石綠檢測(cè)試劑盒操作步驟:
1. 使用前將試劑盒和樣品處理物提前從冰箱中拿出來(lái)使其達(dá)到室溫。裝有洗液的洗瓶。
2.從鋁箔袋中拿出要求數(shù)量的微孔條,放入干燥劑并重新封好袋子以免微孔條受潮。
3. 用移液器吸取75 μl 樣品處理物到對(duì)應(yīng)的測(cè)試孔 ,同時(shí)在每個(gè)孔中都加入75 μl 抗體溶液。
4. 輕輕震動(dòng)30秒使其混勻孵育30分。
5. 孵育完成后,將微孔中的溶液倒入水槽中,用配好的洗板緩沖液清洗微孔。每孔每次至少加入250ul,微震蕩洗滌后倒掉,重復(fù)三次,總共四次洗板。拍板,去掉殘留的洗液。
6. 每個(gè)孔加入150 μL 酶標(biāo)結(jié)合物。
7. 輕輕震動(dòng)30秒使其混勻孵育30分。
8. 孵育完成后,將微孔中的溶液倒入水槽中,用配好的洗板緩沖液清洗微孔。每孔每次至少加入250ul,微震蕩洗滌后倒掉,重復(fù)三次,總共四次洗板。拍板,去掉殘留的洗液。
9. 每個(gè)孔加入150 μL 底物.孵育30分。
10. 每孔加入 100 μL 終止液。
11. 450nm 下讀取每個(gè)孔的吸光度值(OD)。