抗體的概念和分類
作者:陳青(北京維德維康生物技術(shù)有限公司)
所有免疫學(xué)測定的方法中,均要求有抗體參與,沒有抗體參與的生物學(xué)測定方法就不能叫免疫測定法。在elisa中,抗體的優(yōu)劣直接影響測定的質(zhì)量(如特異性、靈敏度、精密度和準確性等)和操作簡便性。因此,了解抗體的基本特性,制備抗體是建立和發(fā)展elisa理想方法的基本條件。
1.抗體概念:
抗體:動物機體某些活性細胞在某些物質(zhì)(抗原)刺激下產(chǎn)生的,并能與這些物質(zhì)特異性結(jié)合的一類活性物質(zhì)。
由于哺乳動物體內(nèi)產(chǎn)生的抗體主要分布于體液,尤其是血清中,因此人們常常將抗血清作為抗體的同義詞,將抗原抗體反應(yīng)稱為血清學(xué)反應(yīng)。實際上抗血清表示從免疫動物體液或免疫細胞培養(yǎng)液中分離得到的原血清或培養(yǎng)液上清液,抗體則表示抗血清中能與抗原特異性結(jié)合的物質(zhì)。
抗體的種類繁多,分類也無一定標準。在免疫學(xué)專著中,常根據(jù)其產(chǎn)生機制、抗原來源、抗原刺激的方式以及與抗原反應(yīng)的性質(zhì)等特征進行如下分類:
在elisa中,為了制備抗體,必須進行人工免疫,并要求用作免疫的抗原(免疫原)來源與免疫動物在分類學(xué)上不屬于同一種,這樣制備的抗體稱為異種抗體。但在自然界中常常發(fā)現(xiàn)同種動物不同的個體之間,其組織成分的結(jié)構(gòu)也有差異,用這些組織成分刺激同種屬的另一個體,也能產(chǎn)生抗體,即同種抗體。某些抗體除與相應(yīng)抗原發(fā)生結(jié)合反應(yīng)外,還可與無血緣關(guān)系的抗原反應(yīng)。如以豚鼠組織免疫家兔,制得的抗體在補體參與下能溶解綿羊紅細胞,這一類抗體稱為異嗜抗體。此外還有一類抗體稱為自身抗體,是由于機體在某種條件下對自身組織(抗原物質(zhì))產(chǎn)生的抗體。這類抗體在elisa中不僅不可能應(yīng)用,而且有干擾作用。根據(jù)抗原刺激的方式認為,凡經(jīng)人工免疫、預(yù)防接種、感染或自然接觸某些抗原物質(zhì)所產(chǎn)生的抗體,都稱為免疫抗體。反之,沒有明顯的抗原刺激即天然存在于體液中的抗體稱為天然抗體。如血型系統(tǒng)中的抗A抗體和抗B抗體等,天然抗體不能用于elisa,相反對elisa測定的質(zhì)量有影響。
所謂*抗體就是通常所指的由抗原刺激機體產(chǎn)生的抗體,其免疫球蛋白的單體有兩個以上的抗原結(jié)合點,因此又稱二價抗體或多價抗體。這類抗體與抗原結(jié)合后可在特定條件下出現(xiàn)可見反應(yīng)。如在普通生理鹽水中*抗體可與可溶性抗原(如蛋白質(zhì)膠體)或顆粒性抗原(如微生物顆粒)反應(yīng),出現(xiàn)可見的沉淀或凝集現(xiàn)象。
不*抗體又稱為單價抗體或封閉抗體,由于免疫球蛋白單體中兩個抗原結(jié)合位點之一失去免疫活性,即只有一個位點可與抗原結(jié)合。這類抗體與抗原結(jié)合后,在生理鹽水中不能形成大的抗原抗體復(fù)合物,故不出現(xiàn)可見反應(yīng),但能封閉和遮掩抗原決定簇,阻遏抗原再與相應(yīng)的抗體結(jié)合。
抗原刺激動物機體后,由多個免疫細胞系(克?。┊a(chǎn)生的抗體,可與同一抗原的多個決定簇結(jié)合,這類抗體稱為多克隆抗體。通常由免疫動物制備的抗血清屬于這一類。在特定條件下,通過克隆選擇(即除掉多余的免疫細胞系),由一個細胞系產(chǎn)生只能識別抗原某一類決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。
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