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膠體金的檢測原理介紹

更新時間:2017-11-24      點擊次數(shù):7617
膠體金是一種常用的標記技術,是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術,有其*的優(yōu)點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學以至生物芯片中都可能例用到。
 
膠體金是氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,金離子還原后聚合成的一定大小的金顆粒,它由一個基礎的晶核(11個金原子形成的二十面體)和包圍在外的雙離子層構成(內層為負離子層AuCl2-,外層是帶正電荷的H+)。由于靜電作用,金顆粒之間相互排斥而懸浮成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài),形成帶負電的疏水膠溶液,故稱膠體金。 質量差的溶液燒制后,液面有漂浮物,大小不一,形狀各異。膠體金顆粒大小,決定了我們用肉眼觀察到的膠體金溶液顏色,由紅到紫色。
 
膠體金一般在弱堿環(huán)境下帶負電荷,會與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合,一般稱這種結合叫靜電結合,所以不影響蛋白質的生物特性。除了與蛋白質結合以外,它還可以與許多其它生物大分子結合,如SPA、PHA、ConA等。根據膠體金的一些物理性狀,如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應,加上結合物的免疫和生物學特性,從而使膠體金廣泛地應用于免疫學、組織學、病理學和細胞生物學等領域。 
 
膠體金具有很高的動力學穩(wěn)定性,在穩(wěn)定因素不受破壞時自身凝聚極慢,可放置數(shù)年不發(fā)生凝聚。影響穩(wěn)定的因素主要有電解質、溶膠濃度、溫度、非電解質等。金溶膠必須有少量電解質作穩(wěn)定劑,但濃度不宜過高。高濃度親水性非電解質能剝去膠粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物質促使溶膠凝聚,但一定量的高分子物質反而可增加溶膠穩(wěn)定性,如蛋白質、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的穩(wěn)定效果。
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