測定生物體內各種微量有機物的方法很多，大致可分為三類：即物理、化學、免疫學方法。在物理學分析方法中，主要借助于高精度的儀器設備，如紫外分光光度計、質譜儀、氣相色譜儀和高壓液相色譜儀等。應用這些儀器設備，雖然可以檢出體內較微量的有機物（可檢出范圍在10^-6mol/L~10^-12mol/L間），但因操作復雜、費時，而且檢測成本較高，因此不利于在生產(chǎn)中推廣應用。

化學方法主要根據(jù)待測物與其他物質的化學反應、產(chǎn)生顏色變化來進行。該方法是zui早用于定量測定生物體內微量有機物質的基本方法。但因其檢出的靈敏度低（要求采樣很多）、特異性差，而且操作麻煩，因此也不利于推廣應用。

普通免疫學測定方法很多，zui大的優(yōu)點是特異性強，其弱點是靈敏度相對較差，而且操作麻煩，不利于進行大規(guī)模測定。60年代發(fā)展的RIA技術在靈敏度方面得到了發(fā)展，可檢出生物體內10^-6mol/L~10^-12mol/L濃度的超微量有機物。相對而言，RIA技術是這些免疫測定技術中較*的一種，因此評價Elisa技術的優(yōu)缺點時，常以RIA技術做參照。

RIA技術中用作指示劑的標記物為放射性同位素，而檢測放射性同位素需要昂貴的儀器設備和輻射防護設備，并需有專門從事放射性同位素工作的實驗室和放射性廢物處理裝置，操作人員的健康常常受放射線照射的威脅。另外，就RIA質量而言，盡管目前靈敏度已達pg/ml水平（即每毫克樣本中含被測物微微克），但不可能有太大的改進，因而其發(fā)展前景不大。此外，作為RIA指示劑的某些放射性同位素，由于半衰期短，如³²P只有14.3天，³³P只有25天，¹²⁵I只有60天，因而限制了RIA試劑的保存時間。

與RIA技術比較而言，Elisa技術在上述方面表現(xiàn)出如下*性：

• 靈敏度高

   雖然酶活性調節(jié)Elisa方法的靈敏度目前并不十分理想，但在酶活性放大Elisa中，檢測的靈敏度遠比RIA高。根據(jù)質量作用定律。即免疫反應所形成的免疫復合物量與反應物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數(shù)為1。已知1個摩爾濃度含6.02×10²³個分子，那么理論推測酶活性放大Elisa方法的zui低檢測限可達1.7×10^-24mol/L。雖然在實際應用中由于反應條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響，往往達不到這個水平（大于10⁴個分子），但表明Elisa在靈敏度方面的改進潛力是很大的。

• 特異性強

從免疫反應的角度來說，Elisa與RIA的特異性應該是一致的。但在Elisa方法中，由于作用檢測指示劑的酶與其底物的反應有專一性，從而增加了該方法的特異性。

• 對儀器設備要求不高，測定成本低

   Elisa測定在普通實驗室便可進行，常用的儀器設備包括加樣器、培養(yǎng)箱、酶標讀數(shù)器等。按現(xiàn)有價格折算，酶標儀的價格只及液閃儀的1/6至1/4，因此每測定一個樣本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法，還可在野外進行，操作十分方便。

• 方法快速、簡便

均質酶免疫測定方法操作時，所有反應試劑均在同一體系內進行，不需任何分離步驟，操作十分簡便、快速，數(shù)分鐘便能得出結果。某些定性Elisa試劑盒，如國外生產(chǎn)的某些奶牛發(fā)情鑒定和妊娠診斷Elisa試劑盒，數(shù)分鐘時間便能完成一次測定。

• 試劑保存時間較長

作為檢測指示劑用的酶和酶標記物，在低溫或干燥條件下相對穩(wěn)定，可保存半年至數(shù)年之久。

• 自動化程度高

Elisa由于不存在放射性同位素污染，因此，除加待測樣本需要人工操作外，其他各步驟均可用儀器自動化完成。在這種自動化條件下，平均每人每天可完成2000余個樣本的檢測工作。

• 方法種類多

Elisa技術可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點，并能利用某些非免疫反應試劑（如SPA、凝集素等）的作用，發(fā)展成為許多新方法。此外，發(fā)展Elisa技術還可以從酶及其底物兩方面著手。這是因為：*，用于Elisa技術的酶其種類遠遠多于可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素。生物界的酶多種多樣，有希望開發(fā)很多類型的酶用于Elisa，并建立相應的Elisa方法。相反，自然界的化學元素是有限的，放射性同位素的種類更加有限。第二，由于酶的多樣性，酶作用底物也有多種多樣，與此相對應的生色源或供氫體的種類也有遠大的開發(fā)和發(fā)展?jié)摿Α?/span>

• 無放射性同位素污染

Elisa技術應用酶促反應作為檢測免疫反應強度的依據(jù)，在終端測定中毋須接觸放射性同位素，根本不存在放射性污染問題（某些為提高檢測靈敏度而建立的酶免疫放射底物方法除外）。

鑒于Elisa技術與RIA技術相比具有以上8個方面的*性，尤其在污染和操作簡便性方面，Elisa技術所具有的長處有利于該項技術在生產(chǎn)和臨床實踐中推廣應用。統(tǒng)計資料表明，盡管RIA技術比Elisa技術早5年誕生，但在生產(chǎn)實踐中的應用還不及Elisa技術普及。原子能機構在推廣應用核技術的同時，也在推廣非放射性同位素標記技術，以縮小“核擴散”范圍。預計在將來，Elisa技術有逐漸取代RIA技術的趨勢。